Projekt Coombsův test detekuje protilátky proti červené krev buňky v pacientově séru a používá se standardizovaným způsobem, například jako součást mateřského screeningu a krevní skupiny. Zkušební postup funguje s králičím sérem a existuje v přímé a nepřímé formě, které se používají pro různé otázky.
Co je Coombsův test?
Zjistit pro protilátky proti erytrocyty, takzvaný Coombsův test se používá. Test detekuje protilátky třídy IgG. The Coombsův test se používá k detekci protilátek proti erytrocyty. Test detekuje protilátky třídy IgG. Tyto protilátky jsou považovány za „neúplné“ protilátky a samy o sobě nemohou způsobit aglutinaci krev buňky. IgM protilátky však mohou způsobit takovou aglutinaci kvůli své pentamerní struktuře, a proto se jim říká „kompletní“ protilátky. V Coombsově testu se k detekci protilátek používá takzvané Coombsovo sérum, známé také jako antihumánní globulin. Coombsovo sérum se skládá z krev sérum králíků imunizovaných proti lidským protilátkám třídy IgG. Zkouška se provádí buď ve zkumavce, nebo aglutinací na mikrokoloně. Coombsův test sahá až k cambridgskému patologovi Coombsovi a je používán uvnitř hematologie primárně pro diagnostiku hemolytických anémií. Tyto anémie mohou ovlivnit například novorozence s neslučitelnost rhesus. V transfuzní medicíně se test používá také k testování sérologické kompatibility. Termín Coombsův test se v zásadě týká pouze testovací techniky a tedy použití antihumánního globulinu. V textové proceduře se přímá forma odlišuje od nepřímé formy.
Funkce, účinek a cíle
V přímém Coombsově testu je detekce IgG dodržována erytrocyty se provádí. Během testu se erytrocyty odebírají z krve pacienta a vylučují se z plazmy. Vyšetřovatel je poté přidá do Coombsova séra a inkubuje je tímto způsobem. Pokud krev nese protilátky proti erytrocytům a tyto protilátky jsou vázány na erytrocyty, váže se sérum Coombs svými protilátkami na lidský IgG testovaného vzorku. Po přidání látky zvyšující reakci dochází k aglutinaci a test je považován za pozitivní. Nepřímý Coombsův test probíhá poněkud odlišným způsobem. Tento test se skládá ze dvou kroků a detekuje protilátky proti cizím erytrocytům. Tyto protilátky volně cirkulují ve vzorku krve a nejsou vázány na erytrocyty. První krok postupu nepřímého testu odpovídá inkubaci vzorku krevní plazmy s testovacími erytrocyty. Pokud jsou protilátky přítomny v testovaném séru, váží se na erytrocyty, přestože nedochází k aglutinaci. Ve druhém kroku se Coombsovo sérum smísí s erytrocyty testeru a dojde k aglutinaci. Pozitivní nepřímý Coombsův test lze použít například k detekci neslučitelnost rhesus dokumentací neúplných protilátek v krvi matky. Přímý Coombsův test existuje výlučně ve výše popsané variantě, a proto se vždy zaměřuje na detekci nebo vyloučení množství protilátek v erytrocytech pacientů. Nepřímý Coombsův test je spojen s různými formami použití, obvykle odpovídajícími screeningovému testu na protilátky nebo testu sérologické kompatibility. Nepřímý test však lze použít také v kontextu pokročilejšího testování a poté se použije například ke stanovení různých specificit protilátek. Zkušební metoda nepřímého testu zůstává stejná, ale její název se může v jednotlivých případech lišit v závislosti na otázce testu. Z tohoto důvodu nemůže laboratoř požadovat nepřímý Coombsův test, ale musí specifikovat účel nebo cíl testování.
Rizika, vedlejší účinky a nebezpečí
S testováním Coombs je obvykle spojeno jen málo rizik nebo vedlejších účinků. Pacientovi může být odběr krve nepříjemný. Možné je také podlitiny. Tyto známky však během několika dní zmizí. Někteří lidé reagují na odběr krve pomocí únava, nevolnost or bolesti hlavy. Ani tyto příznaky však obvykle netrvají dlouho, nýbrž remitují ve stejný den. V každém případě je pacientovi odebráno relativně malé množství krve pro provedení testu, takže k nežádoucím účinkům dochází pouze ve výjimečných případech. Coombsův test nevyžaduje lůžkovou péči, ale lze jej provádět ambulantně. Doba, kterou laboratoř potřebuje k provedení zkoušky, závisí na typu zkušebního postupu a konkrétním cíli zkoušky. Test má zvláštní klinický význam u autoimunitních hemolytik anémie, ve kterém protilátky produkované tělem vlastní imunitní systém způsobit hemolýzu erytrocytů, která vede k anémii. Přímý Coombsův test je u těchto onemocnění obvykle pozitivní. To znamená, že lékař může dát pacientovi po pozitivním testu relativně spolehlivou diagnózu. Situace je jiná, pokud je test negativní. Negativní přímý Coombsův test nemusí nutně odpovídat vyloučení choroby. Existuje také Coombs-negativní varianta autoimunitního hemolytika anémie. V takovém případě musí pacient s negativním testem podstoupit další diagnostické postupy. V případě popsané nemoci, například stanovení autoprotilátky nebo diagnostika prostředí patří mezi další diagnostické postupy po negativním testu. V souvislosti s jinými chorobami lze negativní Coombsův test určitě vyhodnotit jako vyloučení. Za určitých okolností mohou po pozitivním Coombsově testu následovat další vyšetření, která umožní přesnější klasifikaci daného jevu nebo poskytnou další podporu pro pozitivní výsledky testu. Indikace pro Coombsův test zahrnují krevní skupiny, transfuze krve, screening v mateřství nebo podezření na ně neslučitelnost rhesus.
