Fluorescenční in situ hybridizace (FISH) je genetická screeningová metoda pro detekci DNA (deoxyribonukleová kyselina) v jádrech jednotlivých buněk.
Tato metoda zahrnuje použití specifických sond DNA, které mohou poskytnout pouze informace o genomových oblastech, pro které je použitá sonda specifická.
Indikace (oblasti použití)
- Podezření na numerickou chromozomální aberaci:
- Detekce numerických chromozomálních abnormalit (např. Trizomie 21).
- Pro kvantifikaci mozaik pro chromozomální aberace (např. V Ullrich-Turnerův syndrom).
- Detekce mikrodelecí (např. Monosomie 22q11.2).
- Detekce chromozomálních aberací (např. chronická lymfocytární leukémie (CLL), non-Hodgkin lymfom).
Výše uvedené indikace jsou analyzovány mezifázovou FISH (podrobnosti viz „Laboratorní postup“).
Postup
Potřebný materiál
- Heparinová krev (minimálně 1-2 ml)
Příprava pacienta
- Není nezbytné
Rušivé faktory
- Není známo
Laboratorní metoda
Fluorescenční hybridizace in situ (FISH) zahrnuje použití fluorescenčně značených sond DNA (sondy FISH). Ty se mohou vázat na konkrétní místo DNA na chromozomu, kterému se říká hybridizace. Po nebo po navázání fluorescenčně značené sondy lze provést vyhodnocení pomocí mikroskopu. V tomto procesu se určuje počet fluorescenčních signálů v mezifázových jádrech. Dále hodnocení polohy (např. Translokace / posun umístění / do jiného chromozomu) v metafázi chromozomy je možné.
Když různé fluorescenční barviva jsou používány pro různé cílové DNA v postupu FISH, označuje se jako vícebarevná FISH. To umožňuje úplnou vizualizaci genomu.
V některých případech není sonda DNA přímo značena fluorescenčním barvivem, což se nazývá nepřímý postup. Místo toho je označen látkami, jako je biotin nebo digoxigenin. Tato metoda je považována za složitější, ale je citlivější.
