Mikroskopie s fázovým kontrastem je nepostradatelným diagnostickým postupem v gynekologii, který výrazně usnadňuje vyšetření životně důležitých buněk v cervikálním hlenu (cervikální hlen) a vaginálních sekretech (vaginální tekutina). Tento postup navíc umožňuje také hodnocení spermie (sperma).
Indikace (oblasti použití)
- Diagnostika vaginální flóra - při vyšetřování vaginální flóry (vaginální flóry) jsou pomocí mikroskopu s fázovým kontrastem možné následující vyšetření: například diagnóza nedostatku bakteriální kolonizace nebo normální vaginální flóry (kyselina mléčná bakterie) s nebo bez cytolýzy (destrukce buněk) lze provést pomocí tohoto diagnostického postupu. Dále je možné identifikovat bakterie při přípravě a zařadit je do skupin imobilních a pohyblivých bakterií. Kromě toho lze bičíky typu Trichomonas vaginalis, které patří do skupiny parazitů, obvykle spolehlivě detekovat mikroskopem s fázovým kontrastem. Dále mykózy (plísňových chorob) lze spolehlivě detekovat mikroskopem s fázovým kontrastem, takže diagnózu mykózy drozdů lze provést pomocí mikroskopie s fázovým kontrastem. Na základě těchto diagnostických schopností je obvykle možné detekovat infekční cervikální příčinu sterility.
- Zánětlivé markery - podle fázové kontrastní mikroskopie, počet a typ leukocyty (morfologie leukocytů) lze určit.
- Stanovení fáze cyklu - vaginální cytologie se používá ke stanovení fází cyklu menstruačního cyklu. V tomto vyšetřovacím kroku jsou mikroskopicky vyšetřeny povrchové (povrchové) buňky pochvy (pochvy). Posouzení buněk poskytuje informace o aktuální fázi menstruačního cyklu ženy. Ženský cyklus je rozdělen na dvě fáze, první fáze se nazývá folikulární fáze (fáze zrání vajíček) a druhá fáze fáze se nazývá fáze žlutého tělíska (corpus fáze lutea). Je však třeba poznamenat, že stanovení fáze cyklu pomocí mikroskopie s fázovým kontrastem bylo nyní do značné míry nahrazeno hormonální diagnostikou, která zajišťuje vysoký stupeň diagnostické jistoty.
- Sims-Huhnerův test - tento testovací postup, který se také nazývá postkoitální test, se používá k určení, zda spermie (spermie) mohou pronikat cervikálním hlenem (cervikální hlen) a dosáhnout místa oplodnění.
- Posouzení spermie - kromě hodnocení schopnosti spermií pronikat (procházet) cervikálním hlenem může mikroskopie s fázovým kontrastem dále zkoumat počet spermií, jejich pohyblivost a morfologii (vzhled).
- Vyšetření nátěru - v případě podezření, například mykózy (plísňové onemocnění), existuje možnost nátěru pochvy (pochvy) nebo vulvy (souhrn vnějších primárních pohlavních orgánů ženy). Skládá se z: rty a klitoris) nebo případně z anální oblasti odebrat a vyhodnotit mikroskopicky.
Příprava mikrospie s fázovým kontrastem na příkladu hodnocení přítomné vaginální sekrece:
- Na začátku hodnocení vaginálních sekrecí mikroskopem s fázovým kontrastem se připraví dva vhodné nativní přípravky (čerstvý, nefixovaný, obvykle nebarvený přípravek tělní tekutiny, tkáně nebo obsah orgánů pro mikroskopickou detekci živých patogenů).
- Přidání draslík provádí se roztok hydroxidu (KOH) a stolní sůl do vaginální sekrece. Po dokončení míchání se kombinovaná sekrece aplikuje na sklíčko a zakryje krycím sklíčkem. Následně lze provést mikroskopické hodnocení fázovým kontrastem.
Postup
Princip mikroskopie s fázovým kontrastem je založen na interferenci světelných paprsků v dráze paprsku mikroskopu, čímž lze dosáhnout vysoce kontrastního obrazu nezbarvených buněk. Struktura a funkce mikroskopu s fázovým kontrastem:
- Kruhový otvor, kondenzátor, prstencová fázová destička a objektiv jsou zvláště důležité pro funkci mikroskopu s fázovým kontrastem. Vložením prstencového otvoru do kondenzátoru a fázové desky do objektivu dojde k oddělení nedifrakčních a difrakčních paprsků světla. Výsledné zpoždění vlnové délky paprsků difrakčního světla způsobí fázový rozdíl, který opticky vytvoří strukturální detaily mikroskopického objektu, který má být zkoumán, vypadá tmavší než okolní médium. Fyzicky fáze destičky převést rozdíly fáze nebo dráhy na rozdíly amplitudy. V důsledku těchto amplitudových rozdílů se obraz objektu objeví v mikroskopu vzájemným rušením nebo zesílením přímých světelných paprsků procházejících objektem a ohýbaných na objektu.
- Nevýhodou tohoto principu je tedy skutečnost, že ideální fázové přípravy nejsou pravidlem, protože amplitudové efekty jsou obvykle superponovány na fázové efekty.
- Na základě principu zobrazování struktur pomocí rozdílů amplitud jsou stávající buněčné struktury reprezentovány jako odstupňované odstíny šedé v závislosti na jejich vlastní optické hustota. Pro zlepšení reprodukce struktur, použití tenkých přípravků a fáze destičky je označeno. V závislosti na povaze různých fází destičkylze dosáhnout pozitivních i negativních fázových kontrastů, což vede k tomu, že objekty zájmu jsou vykresleny buď tmavší nebo světlejší než jejich okolí.
- U mikroskopie s fázovým kontrastem je také důležité si to uvědomit nekróza (smrt buněk) může nastat relativně rychle v důsledku vystavení světlu a dalšího poškození životně důležitých buněk. V důsledku tohoto rychlého nekróza vývoje, musí být posouzení sklíček provedeno během jedné až dvou hodin, aby byla zachována doba platnosti diagnostického opatření. Toto časové omezení hodnocení životně důležitých vzorků tedy obvykle vyžaduje dokumentaci mikrofotografií nebo v případě potřeby provedením mikrokinematografie. Mikrofotografie je fotografie mikroskopického obrazu pořízená kamerou připojenou k mikroskopu. Prostřednictvím mikrokinematografie existuje možnost zachytit objekty pod mikroskopickým pozorováním v pohyblivých obrazech.
Výhody mikroskopie s fázovým kontrastem:
- Okamžitá diagnostika - časově nenáročné a levně proveditelné.
- Relativně snadné provedení, a proto rychle naučitelné a naučitelné.
- V závislosti na zkušenostech zkoušejícího s relativně dobrou senzitivitou (procento nemocných pacientů, u kterých je onemocnění zjištěno použitím postupu, tj. Dojde k pozitivnímu nálezu) a specificitou (pravděpodobnost, že ve skutečnosti zdraví lidé, kteří netrpí postižená nemoc je také zjištěna jako zdravá)
- Diagnóza je možná bez vnější pomoci (tj. Bez laboratoře třetí strany).
