Detekce tkáňových struktur, protilátky, a Patogenů pomocí imunoznačení je populární, moderní a přesný. Imunofluorescence označuje imunoznačení s připravenou fluorescencí protilátky které jsou vyrobeny tak, aby svítily pod UV světlem. Při přímé imunofluorescenční detekci se testovaný substrát zkoumá přímo luminiscenčně protilátky, bez upstream primárních protilátek nebo umělých antigenů.
Co je přímá detekce imunofluorescence?
Antigeny specifické pro nádor v nádorové tkáni lze detekovat přímo pomocí imunofluorescence. Je tedy možné zjistit, kde v těle existuje metastáz přišel z. Imunofluorescenční přímá detekce je diagnostická metoda založená na poznatcích v imunologii, imunobarvení a imunohistochemii. Zde se zaměřujeme na schopnost protilátek vázat se na specifická místa v tkáni nebo na antigeny v séru. Tyto stránky jsou epitopy. V biochemické diagnostice existují umělé protilátky nebo mimetika (singulární: mimetikum), které umožňují značení těchto vazeb protilátka-antigen pomocí fluorescence nebo radioaktivity. Konjugáty umělých protilátek se ve skutečnosti váží na epitopy na jedné straně a na druhé straně mají fluorescenční marker v případě imunofluorescence. Toto je alternativa k použití radioaktivních značek. Zvláštností přímých detekcí imunofluorescence ve srovnání s nepřímými detekcemi je, že protilátka, která se váže na epitop antigenu ve zkoumaném materiálu, je současně již konjugátem protilátky s fluorescenčním markerem. Pro přímou detekci nejsou nutné další protilátky pro interpozici. V imunofluorescenci fluorescein, který září pod UV zářením, a fluorescein isothiokyanát (FITC) se používají jako barviva konstruovat konjugáty umělých protilátek. Pokud to čte trochu komplikované, ale imunofluorescenční přímé detekce jsou standardní lékařské metody laboratorní diagnostika pro mnoho různých lékařských problémů. Protilátky obsahující fluorescenční barvivo jsou k dispozici připravené k prodeji.
Funkce, účinek a cíle
Pro tkáňové studie jsou k dispozici přímé detektory imunofluorescence pro barvení specifických struktur ve tkáni. Ale existují také pro jednotlivé buňky. To je místo, kde průtoková cytometrie hraje velkou roli. A konečně existují imunotesty sestávající z pevné a kapalné fáze. Imunofluorescenční studie tkání jsou důležité především v onkologii, tj. Při léčbě rakovina. Antigeny specifické pro nádor v nádorové tkáni lze detekovat přímo pomocí imunofluorescence. Tato vyšetření vzorků tkání z nádorů jsou často důležitá pro zjištění, kde v těle existují metastáz pocházejí nebo také za účelem posouzení, zda je nádor benigní nebo maligní. Vyšetření jednotlivých buněk přímou detekcí imunofluorescence se používá k nalezení virových antigenů, bakteriálních antigenů a dalších epitopů. Například se dozvíte, zda jsou buňky infikovány virem a v jaké fázi infekčního cyklu jsou buňky. FACS (= Fluorescence Activated Cell Sorting) je vysoce účinná metoda průtokové cytometrie, při které jsou fluorescenčně značené buňky distribuovány do různých zkumavek v závislosti na typu barvení. Tato metoda je důležitá v imunologii, hematologie a infektologie. Imunofluorescenční imunotesty umožňují přímou detekci toxinů z prostředí, geneticky modifikovaných organismů a určitých přísad v potravinách. V tomto experimentálním uspořádání vždy existuje pevná a kapalná fáze. Četné Patogenů, Včetně AIDS- způsobující HI virus, lze také detekovat přímo. Při detekci infekčních a autoimunitní onemocnění, cílem je často detekovat protilátky spíše než antigeny. To je obrana molekuly produkovaný vlastním tělem imunitní systém. Takové detekce pak nejsou přímými detekcemi podle zde uvedené definice, protože fluorescenční protilátky se nespojují přímo s vlastními antigeny těla, ale s antigeny testované sestavy. Tyto antigeny experimentální sestavy zase navazují na endogenní protilátky. Pouze ve speciálních detekčních a potvrzovacích testech jsou imunofluorescenční přímé detekce používané pro běžné infekce, například HI viry a Chlamydia. Existují testy na mnoho dalších nemocí. Ve většině situací je lepší nepřímá detekce protilátek infekční choroby protože tělo imunitní systém má důmyslnou schopnost pamatovat si předchozí infekce. V jiných situacích se přímá detekce antigenů a nepřímá detekce protilátek vzájemně doplňují. Druhé ukazují, že k infekci došlo dříve, zatímco první poskytují přesnější informace o aktuálním stavu aktivity patogenu.
Rizika, vedlejší účinky a nebezpečí
S přímou detekcí imunofluorescence, stejně jako se všemi lékařskými detekcemi, přicházejí dvě rizika: Riziko falešně pozitivního výsledku a riziko falešně negativního výsledku. Falešně pozitivní výsledky způsobují pacientovi psychické nepohodlí a velké utrpení. K pozitivním výsledkům se proto přidávají další testovací postupy, zvláště když diagnóza vede k drastickým změnám života. Nebezpečí falešně negativního výsledku je, že se pacient včas nedozví o ohrožení svého vlastního zdraví a možná i pro veřejné zdraví. Proto je dobré udělat si rozsáhlý výzkum a připravit k prodeji velké množství různých přímých detekcí imunofluorescence a nabídnout je. Spolu s dalšími přímými a nepřímými detekčními metodami chorob a patologií to zvyšuje přesnost diagnostiky. Přímé detekce jsou založeny na protilátkovém konjugátu, který se na jedné straně váže na epitopy antigenů a na druhé straně také způsobuje fluorescenci současně. Takový výrobek se proto používá pouze v jednom typu zkušebního postupu a nepoužívá se pro jiné typy zkoušek. Toto je důležitý, procedurální rozdíl od nepřímé detekce, ve které se primární protilátky používají proti proudu od fluorescenčních protilátek k vazbě na epitop. Konjugát protilátky je tedy vhodný pro různé testy. Tento procedurální rozdíl se liší od medicínského rozdílu mezi nepřímou detekcí protilátek a přímou detekcí antigenu.
