V antisense procesu antisense oligonukleotidy (krátké jednovláknové nekódující ribonukleové kyseliny) se do buňky zavádějí většinou liposomy (vezikuly, které se často skládají z Fosfolipidy). V tomto procesu je mRNA degradována během krátké doby.
Zavedení buněčného jádra a gen kódování mRNA pomocí vektorů (modifikovaný plazmid (DNA kruh) bakterie) je nejúčinnější - syntéza antisense RNA probíhá tímto způsobem kontinuálně.
Skutečná virová DNA byla upravena takovým způsobem, že nedochází ani k replikaci (duplikaci), ani k transkripci (syntéza RNA pomocí DNA jako šablony) virových genů.
Formováním vodík vazby, antisense oligonukleotid se váže na komplementární (pre) -mRNA.
Mohou nastat tři scénáře:
- Přidaný antisense oligonukleotid je zprostředkován ribonukleázou H. V tomto případě je (pre) -mRNA snížena (tj. Degradace -> ztráta funkce mRNA). Překlad mRNA na protein tedy selže.
- Po navázání na mRNA dochází k takzvané sterické překážce. Tj. Připevnění buňky Proteinů - zvláště ribozomy - již tedy není možné. Translace na protein tedy také není možná.
- Vliv na sestřih (modifikační proces tzv. Spliceosomem (konstrukt pěti různých nekódujících RNA nazývaných snRNA, k nimž Proteinů jsou vázány v každém případě) jako součást zpracování RNA ((pre) -mRNA na mRNA). Zde tzv. Alternativní mechanismy sestřihu (např. Intron není sestříhaný nebo exon je sestřih) lze obejít a exony lze vystřihnout (= přeskakování exonu; exony jsou obvykle ponechány v mRNA). Antisense oligonukleotid brání odstranění exonu, který je nezbytný pro funkci proteinu. V ostatních případech k částečné korekci Raster shift mutací (delece nebo inzerce, takže DNA od té doby má zásadně odlišné základní triplety, což významně mění struktura proteinu), antisense RNA může také způsobit vyříznutí určitých jinak nesestříhaných RNA segmentů. Přes takto diskrétně zkrácený protein byl „resetován“ z místa odstranění do čtecího rámce mRNA do nepatologického stavu.
Terapie
Tento postup se v Německu pro EU používá od roku 2017 terapie of spinální svalová atrofie (SMA), působící na spojování.
Ve Spojených státech se postup také používá (i při sestřihu) u některých forem Duchennova typu svalová dystrofie.
Pro úplnost postup vložení nového gen bude diskutováno: Pomocí vektoru je gen, který není přítomen v DNA, zaveden do jádra buňky. To obvykle kóduje protein, v jehož gen u pacienta byla přítomna mutace a nemohla plnit „požadovanou“ funkci. V roce 2019 byl tento postup schválen ve Spojených státech pro léčbu spinální svalová atrofie.
