Projekt hemoglobin-haptoglobin komplexní test (HHKT) je diagnostická metoda používaná v gastroenterologii k detekci střevního (uvnitř orgánu) krvácení. Základní princip této imunologické diagnostické techniky pro detekci střevní krvácení je založen na biochemických vlastnostech hemoglobin or haptoglobin (protein přítomný v krev plazma). Z tohoto důvodu se zvýšil hemoglobin-haptoglobin komplexy lze detekovat v lumen střeva v případech střevní krvácení. Detekce těchto komplexů se poté provádí pomocí vzorku stolice. Test komplexu hemoglobin-haptoglobin má důležitý význam pro detekci onemocnění spojených s krvácením ve střevním traktu. Na základě toho například hemoroidy, autoimunitní onemocnění postihující střeva nebo různé nádory (střevní polypy; dvojtečka rakovina) lze detekovat testovací metodou.
Postup
Důležitým faktorem úspěchu při včasné detekci například nádorů ve střevní oblasti je nízké požadované množství krev které lze detekovat ve stolici pomocí tohoto imunologického vyšetření. Test komplexu hemoglobin-haptoglobin a test hemoglobinu se provádějí metodou ELISA. ELISA znamená Enzyme Linked Immunosorbent Assay a označuje imunologickou detekční metodu, při které je specifická vazebná reakce mezi protilátky a antigeny se používají k vizualizaci viry, Proteinů or hormonů. ELISA využívá vlastnost konkrétního protilátky používá, že se váží na detekovanou látku (antigen). V závislosti na testu ELISA je možné předem označit protilátku nebo antigen pomocí enzymu (potenciálně aktivní proteinová struktura). Reakce zrychlená enzymem slouží jako důkaz přítomnosti antigenu. Substrát (výchozí materiál) je konvertován příslušným enzymem, takže následně je reakční produkt obvykle detekován změnou barvy nebo přítomností fluorescence. The pevnost Změna barvy je přímo závislá na množství antigenu v jamkách, a tak současně slouží kvantitativnímu hodnocení (hodnocení hmota or koncentrace přítomen) zkušebního vzorku. Komplex hemoglobin-haptoglobin se trvale tvoří intravaskulárně (uvnitř krev plavidla) únikem hemoglobinu z věku erytrocyty (červené krvinky). V tomto procesu se hemoglobin váže na β-podjednotku α-haptoglobinu (speciální struktura haptoglobinu). Tento komplex je rychle vylučován z krve retikulohistiocytovým systémem. Retikulohistiocytový systém zahrnuje všechny fagocytické buňky (vychytávací buňky), které jsou také součástí buněčné imunitní odpovědi. Kvůli rychlému odstranění (odstranění), poločas (čas, kdy je množství sníženo na polovinu) tohoto komplexu je přibližně deset až 30 minut. Ve srovnání je poločas volného haptoglobinu asi pět hodin. U zdravých jedinců je hladina hemoglobinu-haptoglobinu nižší než dva mikrogramy na mililiter krve. Pokud je tato hodnota významně zvýšena, je 95% pravděpodobnost střevní krvácení. Přeprava / skladování: přeprava do 24 hodin, meziskladování v chladničce (4 - 8 ° C) až 1 den možné. Pokud jsou použity speciální systémy sběru, je materiál stabilní po dobu 5 dnů po odběru vzorku při pokojové teplotě.
Indikace (oblasti použití)
- Hemoroidy - v závislosti na stadiu hemoroidů je to klinicky relevantní a může vést k příznakům cévního polštáře.
- Crohnova nemoc - chronické zánětlivé onemocnění střev.
- Ulcerózní kolitida - na rozdíl od toho Crohnova nemoc, ulcerózní kolitida může být identifikována jako kontinuální šíření zánětlivých infiltrátů po zažívací trakt.
- Nádory - test komplexu hemoglobin-haptoglobin zde slouží jako specifická a citlivá metoda pro diagnostiku kolorektálních adenomů a karcinomů. Zde test hemoglobinu a haptoglobinu detekuje zvýšené adenomy, a proto se často kombinuje s imunologickým testem hemoglobinu ve stolici, který je citlivější a specifičtější pro dvojtečka karcinomy.
Výhody testu komplexu hemoglobin-haptoglobin.
- Na rozdíl od jiných detekčních metod je test komplexu hemoglobin-haptoglobin méně citlivý na vitamin C a maso, takže při předchozí konzumaci nemůže dojít k padělání výsledků testu.
- Vzhledem k vysoké citlivosti (procento nemocných pacientů, u nichž je onemocnění detekováno pomocí testu, tj. Dojde k pozitivnímu výsledku testu) a specificitě (pravděpodobnost, že budou detekovány i skutečně zdraví lidé, kteří dané onemocnění nemají jako zdravá v testu) těchto imunologických metod představuje metoda volbu pro detekci krev ve stolici, protože je snadno proveditelný a může poskytnout klinicky smysluplné výsledky.
- Kromě toho má tato metoda tu výhodu, že pacient nemusí dodržovat speciální podmínky strava. Tato výhoda vyplývá ze skutečnosti, že imunologické metody fungují výhradně na principu vysoce specifické vazby protilátky.
- Imunologické testovací metody založené na specifické detekci hemoglobinu ve stolici mají ve srovnání s jinými imunologickými testovacími metodami významné zvýšení citlivosti a specificity. V různých klinických studiích bylo prokázáno, že tento imunologický test detekuje přibližně 95% dvojtečka karcinomy (kolorektální rakoviny) a 70% tlusté střevo (tkáňové výčnělky do lumen tlustého střeva; některé typy polypů tlustého střeva jsou prekancerózní léze pro karcinom tlustého střeva). Nevýhodou je bakteriální degradace hemoglobinu ve střevě, která může vést k falešně negativním hodnotám u starších (> 24 hodin) vzorků stolice.
Nevýhody testu komplexu hemoglobin-haptoglobin.
- Při hodnocení imunologické metody je třeba poznamenat, že ve střevě dochází k bakteriální degradaci hemoglobinu. Z tohoto důvodu existuje možnost falešně negativních hodnot ve starších (více než 24 hodin starých) vzorcích stolice.
Výklad
Pozitivní výsledek testu vyžaduje endoskopické vyšetření celého tlustého střeva (kolonoskopie). Kolonoskopické zpracování by mělo být provedeno do 31 dnů podle evropské směrnice o kvalitě. Vyhodnocení Výzkumného ústavu Kaiser Permanente u pacientů s pozitivním výsledkem testu ukázalo, že riziko rakovina tlustého střeva detekován během kolonoskopie každý měsíc se zvýšila o 3%. Výrazně se však zvýšila četnost nádorů (ve srovnání s pacienty, kteří měli kolonoskopie v prvním měsíci) byl pozorován až po 10měsíčním zpoždění v kolonoskopii.
