Diagnostika prefertilizace nabízí možnost genetického testování žen vajíčka jako část oplodnění in vitro (IVF). Zkoušky se provádějí na chromozomy 1. a 2. polárního tělesa, které se tvoří během 1. a 2. dělení maturace po zavedení muže spermie do vajíčka. Výhodou metody je, že se nejedná o deimure preimplantační genetickou diagnostiku (PGD), protože vyšetření se provádí před fúzí ženských a mužských jader, takže v některých zemích se zákazem PGD je povolena preferenční genetická diagnostika.
Co je diagnostika prefertilizace?
Diagnostika prefertilizace nabízí možnost genetického testování žen vajíčka v kontextu oplodnění in vitro. Diagnostika prefertilizace vytváří možnost detekce chromozomálních aberací na haploidním genomu ženského oocytu v kontextu oplodnění in vitro (IVF). Zejména numerické odchylky určitých chromozomy (aneuploidie) a abnormality určitých genů, které způsobují dědičné nemoci, lze detekovat. Když muž spermie je zaveden do cytoplazmy vaječné buňky během IVF, toto nejprve iniciuje 1. a 2. maturační dělení (meióza I a II) ve vaječné buňce. V každém případě dvě „nadbytečné“ buňky, polární tělesa, která mají identickou sadu chromozomy jako samotný oocyt se produkují v důsledku rozdělení. Polární těla, která by se za normálních okolností tělem rozpadla, jsou odstraněna polárním tělem biopsie for analýza chromozomů. Protože diagnostika preferencí se vždy provádí na polárních tělech, postup se také nazývá diagnostika polárních těl (PCD). Výhodou vyšetřovací metody je, že ji lze provádět i v některých zemích, kde je předimplantační genetická diagnostika (PGD) zakázána, protože vyšetření se provádí na genomu vaječné buňky, když jsou jádra spermie buňka a vajíčko ještě nebyly spojeny. Nevýhodou je, že lze zkoumat pouze chromozomální aberace mateřského genomu. Touto metodou nelze detekovat chromozomy spermií zavedených do cytoplazmy vaječné buňky. Nemoci spojené s Y nelze detekovat, protože haploidní chromozomová sada oocytu nemůže obsahovat Y chromozom.
Funkce, účinek a cíle
Diagnostika preferenčních testů ve formě genetického testování polárního těla dokáže detekovat numerické abnormality (aneuploidie) v určitých chromozomech mateřského genomu, stejně jako translokace, při nichž byly segmenty chromozomů odděleny a znovu vloženy na nesprávné místo. Kromě toho X-vázané gen lze diagnostikovat mutace, které jsou zděděné po matce a jsou založeny na mutaci jednoho genu (monogenetické onemocnění). To vyžaduje, aby bylo možné znát potenciální dědičné onemocnění, aby bylo možné cílit na konkrétní gen na X chromozomu. V případě recesivní dědičnosti existuje šance, že X chromozom polárního těla - a tedy také X chromozom oplodněného vajíčka - obsahuje zdravou alelu odpovídající gen. Samotný postup zahrnuje polární tělo biopsie, ve kterém jsou dvě haploidní polární těla odstraněna z vajíčka a chromozomy jsou poté podrobeny FISH (fluorescence in situ hybridizace) testování. The biopsie laboratoře provádějící test představuje obrovskou výzvu, protože identifikace a izolace polárních těl vyžaduje určité množství zkušeností. Pro testovací postup FISH jsou pro vybrané chromozomy k dispozici takzvané sondy DNA, které se kombinují s odpovídajícími haploidními chromozomy, protože mají komplementární aminokyselinovou sekvenci. DNA sondy jsou označeny různými fluorescenčními barvami, takže chromozomy mohou být následně identifikovány pomocí speciálního softwaru a počítány automatizovaným postupem. Většina chromozomálních aberací, jako jsou aneuploidie a chromozomální posuny v chromozomu, je smrtelná. To znamená, že se během IVF buď netvoří zygota, nebo embryo je zamítnuto po transplantace do děloha, nebo je brzy nebo pozdě potrat. Protože frekvence chromozomálních aberací u žen vajíčka s věkem roste, důležitým cílem diagnostiky preferencí je pozitivní výběr oplodněných vajíček. Pouze oplodněná vajíčka s - pokud je to rozeznatelné - neporušeným genomem jsou znovu transplantována do děloha. Pozitivní výběr je určen ke zvýšení těhotenství porodit s IVF a snížit míru odmítnutých oplodněných vajíček a počet potratů. Dalším cílem je vyloučit dědičná onemocnění založená na chromozomálních aberacích nebo určitých genetických vadách u znovu transplantovaného oplodněného vajíčka od samého počátku pozitivním výběrem oplodněných vajíček. Typická dědičná onemocnění, která lze testem vyloučit, zahrnují cystická fibróza, spinální svalová atrofiea srpkovitá cela anémie.
Rizika, vedlejší účinky a nebezpečí
Diagnostika prefertilizace se provádí mimo tělo, a proto nepředstavuje pro zúčastněnou ženu žádná další fyzická rizika. Drobná fyzická rizika zranění a infekce jsou spojena pouze s vyhledáváním vajec. Na rozdíl od PGD, které zahrnuje také chromozomální vyšetření FISH testem, v diagnostice preferencí lze vyšetřit pouze chromozomální a genetický materiál od matky. To znamená, že pokud je test FISH negativní a nejsou diagnostikovány žádné chromozomální nebo genetické aberace, mohou mít rodiče příliš pozitivní očekávání o průběhu těhotenství a následné narození. Chromozomální aberace otcovského genomu a případně existující anomálie chromozomu Y, které mohou způsobit dědičné onemocnění související se sexem, se nezaznamenávají. V tomto ohledu je diagnostika prefertilizace ještě neúplnější než PGD, ve kterém je celý genom embryo lze vyšetřit ve fázi blastuly. I v případě negativního PGD však nelze vyloučit, že v genomu viru jsou přítomny genetické vady embryo, což může způsobit špatný vývoj a případně vést k poruchám po narození. Test FISH se může vždy týkat pouze vybraných chromozomů a genů.
